« Cytométrie en flux/Le cytomètre en flux » : différence entre les versions

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=== Le trajet optique et les différents types de paramètres ===
La lumière est émise par le laser. Une partie est transmise par la goutelette: elle passe à travers. Cette lumière est lue directement par un PMT. La différence entre l'intensité de la lumière émise et celle reçue permet de savoir que ''quelque chose'' est passé dans la goutte, car ce ''quelque chose'' a empêché le passage de la lumière. En pratique, plus ce quelque chose est grand, plus le signal diminue: ce signalesignal est une focntionfonction de la taille des cellules. Sur la plupart des appareils, il est nommé Forward Scatter ou FSC.
 
Cette lumière brute du laser est également diffusédiffusée par la gouttellette et son contenu. Un PMT, situé en toute fin du trajet optique, et doté d'un filtre n'autorisant le passage que de la lumière émise par le laser, mesure cette lumière diffusée. La lumière est d'autant plus diffusée que la goutte contient de surfaces, car ce sont les surfaces qui diffusent la lumière. La valeur donnée par ce pmt determinedétermine la granulosité des cellules, et proteporte le nom de Side Scatter ou SSC.
 
La lumière du laser excitéexcite également toutes les molécules fluorescentes présentes dans les gouttellettes. Cette lumière ré-émise consiste en un mélange des émissions de toutes ces molécules. Le trajet optique est perpendiculaire au faisceau incident, pour limiter l'éblouïssement des PMT. La disposition des miroirs et des filtres permet d'envoyer sur chaque PMT une bande de longueur d'onde différente. Ce sont ces PMT de fluorescences qui sont généralement numérotés Fl1, Fl2, etc...
 
Selon les modèles de cytomètre, il y a un nombre variable de PMT pour chaque laser, et un nombre variable de laser. Quand il y a deux lasers, leurs faisceaux ne sont pas superposés, afin de pouvoir séparer les lumières émises par les fluorochromes excités par leurs lumières respectives. La seule lumite au nombre de PMT, outre leur prix, est leur encombrement, et celui du système optique associé.