« Cytométrie en flux/La fluorescence » : différence entre les versions

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De nombreuses molécules sont capables d'absorber des photons, et d'augmenter leur énergie d'agitation: la lumière est alors convertie en chaleur. Les molécules fluorescentes - on parle de ''fluorophores'' ou de ''fluorochromes''- ont la propriété d'absorber de l'énergie lumineuse et de la restituer, généralement avec une énergie plus basse (une longueur d'onde plus grande).
 
Ces molécules fluorescentes sont de taille et de nature chimiques diversediverses ; certaines sont suffisamment petites pour être conjuguées à d'autre molécules (comme dans le cas des anticorps couplés à un fluorochromesfluorochrome); d'autres ne sotnsont fluorescentes que dans certains états de chélation (comme les marqueurmarqueurs fluorescents vitaux, qui ne sont fluorescentfluorescents que complexécomplexés à l'ADN).
 
Chaque fluorochrome est caractérisé par :
*sa longueur d'onde d'excitation : la lumière à lui fournir pour que la molécule "fluoresce".,
*sa longueur d'onde d'émission : la lumière émise quand la moélculemolécule est fluorescente,
*ses conditions de fluorescence: certainscertaines molécules ne sont fluorescentes qu'à certainscertaines conditions.
 
En pratique courante, pour minimiser les plages de longueurs d'ondes à considérer, les lumières d'excitation sont produites par des lasers, fournissant une lumière monochromatique.