« Cytométrie en flux/La fluorescence » : différence entre les versions
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La '''fluorescence''' est un phénomène chimique, mettant en jeu des transitions électroniques entre deux niveaux d'énergie superficiels, et déclenchée par autre chose que la simple chaleur, ce qui la différencie de l'incandescence.
== Principe ==
De nombreuses molécules sont capables d'absorber des photons, et d'augmenter leur énergie d'agitation: la lumière est alors convertie en chaleur. Les molécules fluorescentes - on parle de ''fluorophores'' ou de ''fluorochromes''- ont la propriété d'absorber de l'énergie lumineuse et de la restituer, généralement avec une énergie plus basse (une longueur d'onde plus grande).
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En pratique courante, pour minimiser les plages de longueurs d'ondes à considérer, les lumières d'excitation sont produites par des lasers, fournissant une lumière monochromatique.
== Le transfert d'énergie ==
Il est possible d'associer deux fluorochromes entre eux, pour obtenir un transfert energétique entre les deux.
Ainsi, une molécule fluorescente A absorbe un photon d'énergie λ1. Elle émet un photon λ2. Une molécule B absorbe un photon d'énergie λ2, et émet un photon λ3. Si on couple ces deux molécules et qu'on fournit des photons λ1 à la molécule A+B, la lumière émise sera composée de photons d'énergie λ3. Ainsi, en excitant A, on a permis à B d'émettre sa fluorescence spécifique. C’est le principe de base qui permet l'extension des gammes de molécules fluorescentes : ainsi, il existe un fluorochrome, la phycoérythrine, qui peut être couplé à divers types de molécules fluorescentes (cyanines, Texas Red, par exemple), et ainsi, avec la même source de lumière, on pourra différencier diverses lumières émises.
== Voir aussi ==
* [[Cytométrie en flux/Annexe/Fluorochromes usuels|Liste des fluorochromes usuels]]
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