« Cytométrie en flux/Introduction à la cytométrie en flux » : différence entre les versions

Contenu supprimé Contenu ajouté
Immunoman (discussion | contributions)
ajouts
Sharayanan (discussion | contributions)
m typo, ortho
Ligne 4 :
|leçon=[[Cytométrie en flux]]
|numero=1
|précédent=[[Cytométrie en flux|sommaireSommaire]]
|suivant=[[Cytométrie en flux/La fluorescence|La fluorescence]]
|niveau=13
}}
 
La '''cytométrie en flux''' est une technique de laboratoire de biologie cellulaire, utilisant des techniques et matériels hautement spécialisés et sophistiqués. Sa conception relève des sciences de l'ingénieur, de la chimie organique, de la biophysique. Ses applications sont multiples, et sont au fil du temps de plus en plus diversifiées. Il y a à celàcela plusieurs raisons.
 
==Pourquoi la "« cytométrie en flux » ?"==
Comme son nom l'indique, la ''cytométrie en flux'' se propose de mesurer des paramètres de cellules dans un flux. Il s'agit en fait d'examiner une à une les particules d'une suspension, et d'en déterminer certains caractéristiques.
 
Ligne 19 :
 
==Comment la cytométrie?==
La cytométrie utilisant des marqueurs fluorescents permettra de savoir, cellule par cellule, et pour un très grand nombre de cellules, la présence ou l'abscenceabsence d'un marqueur : une cellule est-elle activée ? est-elle mourante? est-elle prête à se diviser?
 
La cytométrie permettra de distinguer facilement des populations, parfois indifférentiables, à l'oeilœil du microscope par la présence de marqueurs membranaires spécifiques de populations. Ainsi, tous les lymphocytes T portent l'antigène CD3. Avec un anticorps anti-CD3 conjugué avec un fluorochrome, le cytomètre pourra classer les cellules selon l'intensité de la fluorescence. C'est la base de l'immunophénotypage et du tri cellulaire.
 
==Applications==
Les applications sont multiples. Avec la cytométrie, il est possible de :
*suivre une population de cellule par la taille et la granulosité du cytoplasme ;
*évaluer la présence de protéines membranaires sur des cellules vivants ;
*trier des cellules vivantes selon l'expression de ces marqueurs ;
*évaluer la présence de protéines cytosoliques sur des cellules perméabilisées ;
*suivre un gène rapporteur fluorescent après transfection ;
*evaluer la viabilité d'une population de cellule, sa mortalité et le type de mort (apoptose ou nécrose).
* ...