Cytométrie en flux/Le tri cellulaire

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Le tri cellulaire est une des premières applications de la cytométrie en flux. Basiquement, on sépare les cellules selon les informations données par le phénotype.

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Principe de fonctionnement

Chaque gouttelette est analysée. Selon les valeurs prises par chaque paramètre, on pourra décider de séparer cet évènement des autres. La séparation est obtenue par électrisation de la goutte, puis déflexion par des champs électriques ou magnétiques. Selon les appareils, on pourra trier une, deux ou quatre populations.

Logiciel

Il est impossible de trier sans signifier à la machine quels sont les évènements à séparer. On fait donc l'analyse de quelques évènements, puis on choisit une combinaison de fenêtres de sélection pour désigner les populations à trier.

En pratique

Chaque trieur est limité par différents facteurs. Les principaux sont les mêmes que pour les cytomètres d'analyse:

• Le nombre de lasers;
• Le nombre de PMT;
• Le débit maximum toléré pour trier;
• Le nombre de populations triables en simultané.